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產(chǎn)品名稱:基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒

產(chǎn)品型號:D6942

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
貨號:D6942
規(guī)格:100T
質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質(zhì)粒主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中,它具有自主復制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。

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D6942基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒的詳細資料:

基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
貨號:D6942
規(guī)格:100T


產(chǎn)品說明:
    質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細胞中。質(zhì)粒主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中,它具有自主復制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達所攜帶的遺傳信息。


質(zhì)粒提取原理及流程:
    較常用的質(zhì)粒DNA提取方法有3種:堿裂解法、煮沸法和去污劑(如Triton和SDS)裂解法。前兩種方法比較劇烈,適用于較小的質(zhì)粒(<15kb)。去污劑裂解法則比較溫和,一般用于分離大質(zhì)粒(>15kb)。堿裂解法是一種應用為廣泛的制備質(zhì)粒DNA的方法,其原理為:染色體DNA比質(zhì)粒DNA分子大得多,且染色體DNA為線狀分子,而質(zhì)粒DNA為共價閉合環(huán)狀分子;當用堿處理DNA溶液時,線狀染色體DNA容易發(fā)生變性,共價閉環(huán)的質(zhì)粒DNA在回到中性即恢復其天然構(gòu)象;變性染色體DNA片段與變性蛋白質(zhì)和細胞碎片結(jié)合形成沉淀,而復性的超螺旋質(zhì)粒DNA分子則以溶解狀態(tài)存在液相中,離心去除沉淀后,就可從上清中回收質(zhì)粒DNA。目前,市面上質(zhì)粒提取試劑盒大多數(shù)都是采取上述的堿裂解方法,不同之處在于純化方式。目前比較常用的純化系統(tǒng)是硅基質(zhì)吸附材料,其原理為在高鹽環(huán)境下質(zhì)粒DNA能夠結(jié)合到硅基質(zhì)上,然后用低鹽緩沖液或水將質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)上洗脫下來。得到的質(zhì)??梢杂糜诿盖?、PCR、測序、細菌轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染等分子生物學實驗。


質(zhì)粒鑒定與評價:
瓊脂糖電泳檢測
    堿裂解法提取的質(zhì)粒經(jīng)瓊脂糖電泳進行鑒定時,理想狀況是只出現(xiàn)超螺旋—條帶,但在質(zhì)粒提取過程中,由于機械力、酸堿度、試劑等原因,使質(zhì)粒DNA鏈發(fā)生斷裂,可能出現(xiàn)兩條帶或者出現(xiàn)三條帶,這三條帶電泳遷移率從快到慢,分別是超螺旋、開環(huán)和復制中間體(即沒有復制*的兩個質(zhì)粒粘連在—起)。如果加溶液Ⅱ后過度振蕩,會在遠離這三條帶的位置出現(xiàn)條帶,這條帶泳動得較慢,是大腸桿菌基因組DNA的片斷。非常偶然的是,有時候提取的質(zhì)粒會出現(xiàn)4個以上的條帶,這是由于特殊的DNA序列導致了不同程度的超螺旋(超螺旋的圈數(shù)不同)所致。但是,只要質(zhì)粒經(jīng)單酶切鑒定后,只有單一條帶,就證明沒有基因組的污染。酶切檢測質(zhì)粒提取后,為了進—步鑒定質(zhì)粒的正確與否,就要進行酶切鑒定,通過與Marker對比,確定質(zhì)粒的分子量大小。用紫外線分光光度計檢測濃度測定標準為:OD 260 值為1相當于大約50ug/ml雙鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值1.7-1.9之間說明所得DNA純度較好。OD 260 /OD 280 比值若低于1.7說明可能有蛋白污染。OD 260 /OD 280 比值若高于2.0則說明DNA有可能已降解。如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子濃度會影響光吸收值,但并不表示純度低。

 

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基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
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