β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性檢測試劑盒

產品名稱: β-半乳糖苷酶(β-GAL)活性檢測試劑盒

產品英文名:  β-galactosidase（β-GAL）Assay Kit

產品貨號：BC2580           產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯東U谷8三樓

產品規(guī)格：50管/24樣             產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：750
庫存狀態(tài)：現貨                          
關鍵字: β-半乳糖苷酶檢測試劑盒|β-GAL檢測試劑盒|β-半乳糖苷酶|試劑盒

簡要介紹：
β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量，還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。
β-GAL 分解對-硝基ben-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基ben酚，后者在400nm 有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL 活性。

產品詳細描述
產品內容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入5mL 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二：液體15mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體80mL×1 瓶，4℃保存。
標準液：液體1ml×1支，4℃保存，5μmol/ml對硝基ben酚溶液。

產品說明：
β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量，還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。
β-GAL 分解對-硝基ben-β-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基ben酚，后者在400nm 有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算β-GAL 活性。

需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取：

1. 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10⁴ 個）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3. 標準液的處理：用試劑二將標準液稀釋200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/ml.

• 測定步驟
• 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節(jié)波長400nm，蒸餾水調零。
• 樣本測定，（在EP管或96孔板中依次加入下列試劑）：

充分混勻，室溫靜置2min后， 400nm處測定吸光值A。△A=A測定管-A對照管

β-GAL 活性計算：
根據標準管的吸光度（x）和濃度（y，nmol/ml）建立標準曲線，將△A帶入標準曲線中，計算樣品生成的產物量（nmol/ml）。

1. 按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg 組織蛋白每小時產生1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y×V 反總)÷(V 樣×Cpr)÷T
=20×y÷Cpr
需要另外測定，建議使用本公司BCA 蛋白質含量測定試劑盒。

1. 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g 組織每小時產生1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /g 鮮重)＝(y×V 反總)÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T
=20×y ÷W

1. 按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1 萬個細菌或細胞每小時產生1nmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
β-GAL 活力(nmol/h /10⁴ cell)= (y×V 反總)÷(500×V 樣÷V 樣總)÷T
=0.04×y
Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；V 反總：反應體系總體積，0.5mL；V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質量，g； 500：細胞或細菌總數，500 萬；T：反應時間，0.5h。


相關產品
BC0340 糖原含量檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
BC0345 糖原含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC2450 植物組織果糖(FT)含量檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
BC2455 植物組織果糖(FT)含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC2540 纖維素酶(CL)檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
BC2545 纖維素酶(CL)檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
BC0330 海藻糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
BC0335 海藻糖含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC2510 海藻糖酶檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
BC2515 海藻糖酶檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
BC2520 山梨醇含量檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
BC2525 山梨醇含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC2530 山梨醇脫氫酶檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
BC2535 山梨醇脫氫酶檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC0230 還原糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
BC0235 還原糖含量檢測試劑盒 微量法 100管/48樣
BC2490 血糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法  50管/48樣
BC2495 血糖含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC2500 葡萄糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法  50管/48樣
BC2505 葡萄糖含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣
BC0030 植物可溶性糖含量檢測試劑盒 可見分光光度法  50管/48樣
BC0035 植物可溶性糖含量檢測試劑盒 微量法 100管/96樣

相關文獻：
《Exosomes from hyperglycemia-stimulated vascular endothelial cells contain versican that regulate calcification/senescence in vascular smooth muscle cells》 作者:Shuang Li?, Jun-Kun Zhan?, Yan-Jiao Wang, Xiao Lin, Jia-Yu Zhong, Yi Wang, Pan Tan, Jie-Yu He, Xing-Jun Cui, Yi-Yin Chen, Wu Huang and You-Shuo Liu 期刊:Cell & Bioscience 影響因子:3.405 PMID:30622695
《Apple fruit acidity is genetically diversified by natural variations in three hierarchical epistatic genes: MdSAUR37, MdPP2CH and MdALMTII》 作者:Dongjie Jia,Fei Shen,Yi Wang,Ting Wu,Xuefeng Xu,Xinzhong Zhang,Zhenhai Han 期刊:Plant Journal 影響因子:5.726 PMID:29750477
《Genistein protects against ox-LDL-induced senescence through enhancing SIRT1/LKB1/AMPK-mediated autophagy flux in HUVECs》 作者:Huaping ZhangEmail authorXiaorong YangXuefen PangZhenxiang ZhaoHaixia YuHui Zhou 期刊:Molecular and Cellular Biochemistry 影響因子:2.884 PMID:30443855
《Possible role of β-galactosidase in rheumatoid arthritis.》 作者:Zhipeng Su, Jingjing Gao, Qing Xie, Yanping Wang & Yunsen Li 期刊:Mod Rheumatol 影響因子:1.973 PMID:31269834
《Micro-RNA335-5p targeted inhibition of sKlotho and promoted oxidative stress–mediated aging of endothelial cells》 作者:Yixin Liu, Peng Lai, Juelin Deng, Qiukui Hao, Xinyi Li, Ming Yang, Hui Wang & Birong Dong 期刊:Biomark Med 影響因子:2.268 PMID:30785341